Utilisation de la semence congelée : « les paillettes magiques »

En effet, elle nous permet plusieurs années après le décès d’un étalon d’obtenir une descendance et ce même si les paillettes ont plusieurs dizaines d’années (nous avons déjà utilisé des paillettes de 1978 avec une portée à la clef !). Mais elle facilite également les échanges de semence entre pays permettent de passer outre les barrières de distance ou sanitaires.

Pourquoi cette technique est-elle peu utilisée en France alors que la pratique est largement rependue dans d’autres pays d’Europe (pays scandinaves) et dans la plupart des autres pays (Etats unis, Russie, Japon, Australie Etc.) ?

Dans un premier temps les différentes étapes techniques seront décrites et ensuite nous détaillerons la plupart des situations en élevage où vous pourrez faire appel à l’utilisation de semence congelée : mais attention cette technique révolutionnaire nécessite une rigueur exemplaire sous peine de mauvais résultats.

L’insémination en semence congelée consiste à utiliser du sperme congelé et conservé à très basse température sous forme de paillettes de 0,25 ml ou de 0,5 ml ou des pastilles (« pellets ») de 1 ml.

L’engouement pour la cynophilie fait de cette technique une opportunité pour les éleveurs qui veulent parfaire leurs méthodes de sélection et s’assurer le maintien du potentiel génétique de leur élevage.

Quand congeler du sperme

Le praticien peut conseiller cet acte lorsqu’un étalon possède une grande valeur génétique, lorsque l’on veut pouvoir l’utiliser après sa disparition dans un but d’amélioration génétique (les croisements grand-père-petite fille, utilisés fréquemment en sélection canine sont grandement facilités), lorsqu’il risque de décéder prématurément (chien de chasse au sanglier, chien de sauvetage), lorsqu’un traitement médical risque de le rendre stérile (chimiothérapie, traitements hormonaux lors d’affection prostatique). L’insémination en semence congelée permet d’utiliser la semence d’un étalon même si celui-ci n’est plus disponible pour des saillies. On peut également mentionner la technique aux propriétaires de mâles qui veulent garder un descendant pour des raisons sentimentales et en « remplacement » du clonage non réalisable chez le chien.

Enfin, cette technique permet les échanges internationaux de semence, particulièrement utiles lorsqu’il existe des barrières sanitaires ou douanières.

Le meilleur moment pour prélever

Le moment idéal pour prélever se situe entre l’âge de deux et six ans. Cependant les conditions d’obtention des titres (travail et beauté) et l’utilisation souvent tardive de certains étalons ne permettent pas toujours d’envisager une congélation pendant cette période. On peut envisager la congélation de la semence d’un chien de tout âge (jusqu’à 15 ans !) à partir du moment où il produit des spermatozoïdes mobiles, normaux et en quantité suffisante. D’autres facteurs que l’âge peuvent affecter la qualité de la semence, il faudra en tenir compte pour choisir le moment du prélèvement : abstinence prolongée ou au contraire sur utilisation, stress, compétition, saison chaude, toute affection hyperthermisante, libido faible, etc. Il faudra alors reporter le prélèvement de quelques mois pour avoir un échantillon correct.

Dans certains cas, (chien ayant une espérance de vie courte ou nécessitant une chimiothérapie) on peut éventuellement conserver des échantillons en dessous des normes tolérées mais dans tous les cas le propriétaire sera informé de la faible chance de réussite si les test de décongélation sont mauvais (inf. à 50% de mobilité). Les techniques futures de procréation canine (insémination intratubaire, ICSI) pourront peut-être dans l’avenir permettre l’utilisation de semences inadaptées avec les techniques actuelles.

Comment est réalisée une congélation de semence canine

1/ Accueil du propriétaire de l’étalon :

Recueil des attestations de propriété et du pedigree du chien ;

Vérification de l’attestation de propriété et de l’identité du chien ;

Signature par le propriétaire d’un contrat dans lequel il demande le prélèvement, l’examen, la congélation et le stockage de la semence de son étalon.

2/ Réalisation de tests biologiques sur l’étalon :

L’identification génétique permet d’éviter tout litige ultérieur possible avec l’utilisation de la semence congelée. La sérologie brucellose permet d’utiliser la semence vers l’exportation vers certains pays. Parfois une sérologie leptospirose est également demandée.

3/ Commémoratifs sur le passé reproducteur de l’étalon :

Nous conseillons généralement de faire réaliser un prélèvement de sperme par le vétérinaire praticien dans le mois qui précède afin de s’assurer que le chien est facilement prélevable et que la qualité de la semence est correcte. Ceci est d’autant plus valable si le chien n’a jamais été prélevé ou s’il a eu une période d’abstinence supérieure à 6 mois. D’autre part, nous déconseillons toute saillie dans les 8 jours qui précédent.

4/ Préparation des paillettes : Les paillettes doivent porter quatre indications :

- la date du prélèvement ;

- la race de l'étalon (numéro de code FCI) ;

- le numéro d’identification (Puce ou tatouage ) ;

- le nom de l'étalon (ou ses 5 premières lettres) .

5/ Le prélèvement de sperme en présence d’une chienne en chaleur :

Séparation des trois fractions du sperme, seule la deuxième fraction dite spermatique est conservée. Elle contient la majeure partie des spermatozoïdes de l’éjaculat.

6/ Examen du sperme

- Aspect : les échantillons contenant du sang ou de l’urine sont éliminés ;

- Examen de la mobilité au microscope à contraste de phase et d’une platine chauffante ;

- Calcul de la concentration ;

- Recherche d’anomalies des spermatozoïdes.

Ne sont conservés que les éjaculats dont la mobilité immédiate est supérieure à 70 % et dont les formes anormales des spermatozoïdes sont inférieures à 30% (sauf cas particuliers).

7/ Préparation du sperme dans un dilueur spécial (à base de glycérol) et remplissage des paillettes préalablement identifiées.

8/ La congélation proprement dite (abaissement de la température par paliers).

9/ Contrôle de qualité 24 heures post congélation : ne sont conservés uniquement les spermes dont la mobilité post décongélation est supérieure à 50%.

10/ Calcul du nombre de doses inséminantes stockées et envoi d’un rapport au propriétaire.

11/ Conservation des paillettes dans des cuves contenant de l’azote liquide à -196°C.

Calculer une dose

La dose optimale recommandée par tous les spécialistes de la reproduction canine en Europe est de 150 millions de spermatozoïdes mobiles. La réalité est souvent différente : en effet les doses inséminantes calculées par certaines banques de semence (notamment aux USA) est souvent inférieure. On reçoit régulièrement des doses de moins de 80 millions de spermatozoïdes mobiles. Les transactions sont réalisées par les propriétaires des femelles et ceux-ci sont rarement au courant des normes à exiger pour avoir des chances de réussites raisonnables.

Il ne faut pas confondre paillette et dose. En effet une paillette de 0.5 ml en général contient entre 50 millions et 100 millions de spermatozoïdes. Par exemple sur des paillettes à 50 millions avec une mobilité post-décongélation de 60 %, il faut 5 paillettes pour avoir la dose optimale.

Cette norme est modulable en fonction des races : on a ainsi besoin de moins de spermatozoïdes dans les petites races (80 à 100 millions de mobiles).

Les règles du succès

On doit respecter impérativement 3 règles:

1/ Le moment de l’insémination : L'intervention n'a aucune chance de succès si elle n'est pas mise en oeuvre exactement entre trois et quatre jours après l'ovulation c'est à dire au moment de fécondabilité maximum. La survie des spermatozoïdes dépasse exceptionnellement 24 heures.

2/ L’utilisation d’au moins une dose inséminante.

3/ La technique d'insémination : elle doit être intra-utérine (transcervicale ou chirurgicale).

Gérer un stock

La gestion de l’utilisation des paillettes est variable en fonction de plusieurs paramètres. Dans le cas où l’étalon est décédé et si nous n’avons pas un très grand nombre de doses inséminantes ou bien si ces doses sont de qualité moyenne, il est primordial de planifier l’élevage avec une chienne ayant une capacité reproductrice prouvée : chienne ayant déjà eu une portée sans difficultés et sans complications, ayant des chaleurs normales.

Dans le cas où l’étalon est encore vivant, nous devons dans la mesure du possible (semence du chien de bonne qualité et localisation permettant un envoi facile de l’échantillon) orienter le propriétaire vers une insémination en semence réfrigérée.

Aspect réglementaire entre pays

La réglementation concernant les échanges de semence canine est très variable d’un pays à l’autre. Il faut se renseigner par avance pour savoir si un permis d’importation est exigé, si des contrôles sanitaires sont nécessaires (tests sérologiques de dépistage de brucellose canine ou de leptospirose) ou si une carte d’identité génétique du chien donneur est demandée.

Transport de la semence

La semence congelée voyage dans des « Dry Shipper ». Ce sont des emballages isothermes qui contiennent de l'azote liquide réfrigéré entièrement absorbé dans un matériau poreux, pour un transport à basse température de produits non dangereux. Ils ne sont pas assujettis à la réglementation sur les marchandises dangereuses autant que leur conception empêche l'augmentation de la pression intérieure du contenant et toute déperdition d'azote liquide réfrigéré, quel que soit le sens dans lequel l'emballage isotherme se trouve placé. Il convient néanmoins d’anticiper l’envoi de la semence congelée, afin de pouvoir organiser correctement l’expédition.

Pourquoi utiliser de la semence congelée ?

1/ Aspect sentimental : même si cet aspect est bien loin de la conduite d’un élevage il est largement justifiable pour garder des qualités de chasse qui vous conviennent. Vous pouvez grâce à cette technique garder la génétique d’un chien qui a marqué votre existence. Si le clonage n’est pas réalisé en routine dans l’espèce canine vous pouvez de façon simple avoir pendant plusieurs générations des descendants directs de ce chien.

2/ Aspect Génétique : vous avez peut-être dans le cadre d’une politique d’élevage atteint en grande partie ce que vous recherchez, vous pouvez ainsi conserver cette génétique et être d’une part à l’abri d’une erreur d’élevage (introduction d’un défaut grave à la faveur d’une saillie) ou revenir plusieurs années plus tard sur le courant de sang direct. Si cet aboutissement est obtenu sur une femelle (on ne peut congeler en routine les ovocytes actuellement), pensez à congeler les mâles collatéraux.

3/ Aspect commercial : La semence congelée vous permet d’expédier sans problème de la semence dans le monde entier sans aucun impératif par rapport au timing de la saillie : ainsi l’acquéreur des paillettes peut très bien stocker la semence et l’utiliser quand bon lui semble.

4/ Aspect conservateur : un accident est malheureusement vite arrivé sur un sujet d’exception (renversé par une voiture, maladie, sanglier lors d’une partie de chasse….) et il vaut mieux être prévoyant surtout sur un jeune sujet et garder des paillettes.

5/ Utilisation en cas d’indisponibilité de l’étalon : Votre chien part en concours en Serbie et on vous demande une saillie en France ? Si vous avez stocké des paillettes dans une banque de semence vous pourrez proposer quand même votre chien à la reproduction.

Cependant il faut garder en mémoire plusieurs éléments essentiels :

1/ Ne jamais utiliser de la semence congelée sur une chienne ayant déjà eu des problèmes de fertilité (par exemple une chienne restée vide).

2/ Faire réaliser un suivi d’ovulation très précis (une erreur de 12 heures est synonyme d’échec).

3/ L’insémination doit être réalisée en intra-utérin, c’est à dire par un praticien ayant été formé à cette technique.

4/ Si la dose utilisée est classiquement de 150 millions, on conseille lors de l’utilisation pour suppléer un mâle indisponible des doses plus importantes ou bien de doubler l’insémination afin d’optimiser les chances de réussite. En saillie naturelle ou insémination en semence fraiche, le taux de réussite est autour de 85%, en semence congelée, réalisée dans les règles de l’art, le taux est de 70 à 75%. Si la semence est de mauvaise qualité si l’insémination est réalisée dans de mauvaises conditions (non réalisée en intra-utérin ou semence de mauvaise qualité) le taux peut chuter à moins de 30%.

Où congeler la semence d’un étalon en france ?

Il existe 4 banques de semence canine privées regroupées au sein de l’ABSCA (Association des Banques de Semence Canine) qui proposent des services de congélation, stockage, import-export, insémination intra-utérine… De plus certaines d’entre elles proposent des possibilités de congélation délocalisées : n’hésitez pas à les contacter.

L’engouement pour la cynophilie fait de cette technique une opportunité pour les éleveurs qui veulent parfaire leurs méthodes de sélection et s’assurer le maintien du potentiel génétique de leur élevage. Le chien doit être prélevé dans une banque de semence agréée et gérée par des vétérinaires spécialistes en reproduction afin d’assurer que la progéniture soit correctement inscrite au LOF et que les résultats de congélation et de conservation soient optimisés

On peut dans l’avenir, si les éleveurs Français prennent conscience de la puissance de cette technique, envisager d’avoir un catalogue conséquent d’étalons de renoms que vous allez pouvoir utiliser même quand ils sont en déplacement ou plusieurs années après leur décès.

Utilisation de la semence congelée : « les paillettes magiques »

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Philippe Mimouni Docteur vétérinaire Centre de Reproduction des Carnivores Domestiques du Sud-Ouest (CRECS)

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Philippe Mimouni
Docteur vétérinaire
Centre de Reproduction des Carnivores Domestiques du Sud-Ouest (CRECS)